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細梗香草皂苷活性炭脫色工藝單因素試驗

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2021-12-17 10:30【

準確移取稀釋 20 倍后的細梗香草皂苷提取 10mL 于具塞試管中,加入 3% 活性炭,搖勻 后放入 60℃水浴鍋中脫色 60min,固定其他條 件,分別對活性炭添加量、脫色時間、稀釋梯度 及脫色溫度 4 個因素進行單因素脫色試驗,考察 各因素對細梗香草皂苷的保留率和脫色率的影 響。單因素設計水平見表 1。

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正交試驗優(yōu)化脫色條件

為考察各因素的交互影響,根據單因素試驗 結果,采用正交試驗設計,以活性炭添加量、脫 色時間、稀釋梯度及脫色溫度為 4 個因素,細梗 香草皂苷提取液的保留率和脫色率為考察指標, 按照表 2 設計 L9 34 )正交試驗,從而優(yōu)化脫色 工藝條件。

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細梗香草皂苷抑菌活性試驗

將活化后培養(yǎng)至對數期的大腸桿菌、金黃色 葡萄球菌、枯草芽孢桿菌和白色念球菌的菌懸液 濃度調至 106 CFU/mL,取 100μL 菌液于 LB 培養(yǎng) 基平板上均勻涂布,打孔器分別打孔,孔中加入 不同濃度梯度的細梗香草皂苷提取液 100μL,平 板置于 4℃條件下預擴散 2h 后,白色念球菌于 30℃恒溫培養(yǎng),其余放入 37℃恒溫培養(yǎng) 24h 后, 游標卡尺測定抑菌圈的直徑。同時以甲醇溶液作 為空白對照。


活性炭添加量對脫色效果的影響

如圖 1 所示,總體上隨著活性炭添加量的增加,皂苷脫色率逐漸升高,保留率漸漸減小。當 添加量達 3% 后,皂苷脫色率的增幅趨勢變??; 保留率隨活性炭用量增加而逐漸減小。根據試驗 結果,為保證皂苷脫色率和保留率達一定水平, 選取活性炭用量 2% 為最佳添加量。

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脫色時間對皂苷脫色效果的影響 由圖 2 可以看出,伴隨著脫色時間的延長, 皂苷的脫色率有所上升,在 60min 之后趨于平 穩(wěn),而保留率相對處于比較平穩(wěn)的水平。這說 明,當試驗進行到一定程度后,脫色時間對脫色 效果的影響較不明顯,這可能由于活性炭對色素 的吸附作用在一定時間內達到了平衡。所以考慮 選擇 60min 為脫色時間最優(yōu)條件。